蛋白印痕法是一种蛋白质检测技术性,最开始是由外国人乔冶.斯塔克创造发明的。它运用电泳技术把特殊组织或体细胞中的蛋白提取,固定不动的NC膜或是PVDF膜上,再用特异性抗体检测特殊的抗原体。更是能寻找造成病症的抗原体,这类技术性如今已被普遍用以疾患诊断等好几个微生物行业。下边我们讨论一下它的猪脚流程。
一、基本原理
与Southern Blot或Northern Blot混种方式相近,但Western Blot法选用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检验物是蛋白,“探头”是抗原,“着色”用标识的二抗。历经PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离出来的蛋白试品,迁移到固相媒介(比如硝酸纤维素塑料薄膜)上,固相媒介以非共价键方式吸咐蛋白,且能维持电泳分离的活性多肽种类以及分子生物学特异性不会改变。以固相媒介上的蛋白或活性多肽做为抗原体,与相匹配的抗原起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗原起反映,历经底物着色或放射性自显影液以检验。
2020-11-24 23:52:35